PCR芯片是經(jīng)過(guò)對(duì)Q-PCR體系優(yōu)化而開發(fā)的PCR檢測(cè)體系?？朔薗-PCR檢測(cè)基因表達(dá)數(shù)量少等不足之處，其同時(shí)可對(duì)多種基因進(jìn)行研究，且可在更短的時(shí)間內(nèi)得到更豐富的信息。PCR芯片實(shí)驗(yàn)僅需2小時(shí)。PCR芯片可廣泛用于生命科學(xué)、生物技術(shù)、疾病檢測(cè)、臨床醫(yī)學(xué)和環(huán)境檢測(cè)等領(lǐng)域，是近年生命科學(xué)領(lǐng)域常用的研究手段之一。

PCR芯片實(shí)驗(yàn)過(guò)程：

1.        將RNA樣品反轉(zhuǎn)錄為cDNA鏈，作為PCR模板。

2.        將模板加入到反應(yīng)體系（RT2Real-TimeTMSYBRGreenPCRMasterMix）中。

3.        在已經(jīng)固定好基因特異性引物的96孔板各孔中，加入等量的PCR反應(yīng)體系，進(jìn)行PCR反應(yīng)。

4.        采用儀器配套的軟件計(jì)算PCR芯片中的每個(gè)基因的循環(huán)閾值（Ct）。

5.        后，采用△△Ct方法比較對(duì)應(yīng)的兩個(gè)樣本中同一基因的表達(dá)量變化。通過(guò)分析看家基因Ct值的一致性，可確定合適的標(biāo)準(zhǔn)化方法。芯片所設(shè)置的對(duì)照，可以檢測(cè)PCR體系中是否存在DNA污染，或者是否有影響反轉(zhuǎn)錄或PCR實(shí)驗(yàn)步驟的因素存在。

該技術(shù)存在一定技術(shù)難度，主要難點(diǎn)在與相同的PCR反應(yīng)條件下保證不同的基因有相近的擴(kuò)增效率，并且獲得與單個(gè)基因?qū)崟r(shí)定量PCR反應(yīng)相當(dāng)?shù)撵`敏度，特異性和可重復(fù)性。因此需進(jìn)行PCR引物和反應(yīng)條件的優(yōu)化。

與普通PCR相比，PCR芯片具有整體性，操作簡(jiǎn)便，效率高，反應(yīng)體系小，便于集成化，結(jié)果可靠等優(yōu)勢(shì)。

服務(wù)流程

1.        提取樣本RNA

2.        RNA質(zhì)量檢測(cè)

3.        cDNA模板制備

4.        數(shù)據(jù)處理